Сначала прибыл овцы, мыши, козы и коровы. Теперь, две независимых исследовательских группы добавили клонированных свиней к списку видов. Результаты ожидались нетерпеливо, потому что физиологическое подобие свиней людям делает их потенциальным источником органов дарителя.Зоологи испытали затруднения при клонировании свиней; методы, используемые у другого домашнего скота, не работали также.
Тем не менее, шотландская компания под названием Терапия PPL объявила о рождении первых в мире клонированных поросят в мартовском пресс-релизе. В то время, компания приписала свой успех новому подходу, но не покажет деталей. Между тем Акира Ониши, селекционер животных в Национальном Институте Японии Животноводства в Цукубе и его коллег решал их собственный подход. Это привело к поросенку, Xena, 2 июля; результаты будут изданы в выпуске 18 августа Науки. (Щелкните здесь для показа видеоклипа Xena.)
Onishi и его коллеги использовали метод, произведший Долли, овцы, выделяющие клонирующееся безумство в 1997, но с некоторыми разновидностями. Для создания Долли исследователи вынули ядро из зрелого яйца и заменили его ядром от клетки овцы, которую они хотели клонировать; тогда они активизировали развитие с электрическим пульсом и внедрили эмбрион в суррогатную овцу матери.Как источник их ядра, японская бригада взяла клетки соединительной ткани от 24-дневных зародышей черной породы свиньи. Как был сделан с Долли, они сначала лишили те клетки питательных веществ для закрытия деления клетки и большей части активности гена.
Но следующий шаг – передача ядра – отличалась; вместо того, чтобы плавить клетку дарителя с выясняемой яйцеклеткой, бригада удалила ядро дарителя с очень тонкой иглой и ввела его в яйцо дарителя. Этот подход «микроинъекции» был введен впервые бригадой на Гавайях для производства Cumulina, первой клонированной мыши (ScienceNOW, 22 июля 1998).
Xena был единственным оставшимся в живых 110 клонированных эмбрионов, помещенных в четырех суррогатных свиней. Ее цвет легко показал ее генетическую личность – несмотря на то, что родились белой свинье, она была черной – и независимые исследования ДНК подтвердили, что ее ДНК соответствовала дарителю эмбриональная клетка. «Это – большой успех», говорит Филип Дэмиэни, репродуктивный физиолог в Наступающих Клеточных технологиях в Вустере, Массачусетс. «Оказывается, что микроинъекция может использоваться у больших животных и домашнего скота».Бригада PPL использовала традиционный метод сплава для бракосочетания на клеточном ядре дарителя на яйце.
Но Ирина Полеяева PPL тогда добавила второе ядерное перемещение к клонирующемуся протоколу: Как только переданное расширенное ядро, как это, как правило, делает, бригада PPL, удалило то ядро еще раз и поместило его в другую просто оплодотворенную яйцеклетку. Несмотря на то, что исследователи сначала удалили ДНК и яйца и спермы оплодотворения, яйцо было все еще запущено для деления клетки и развития, увеличив шансы на успех, заявляет бригада. Пять клонов поросенка родились приблизительно от 401 эмбриона, внедренного в суррогатных свиней.
Результаты PPL все еще не были изданы, но Природа отправила по почте газету, описывающую их на ее веб-сайте.Жюри все еще отсутствует, над которым метод работает лучше всего. Но коллеги говорят, что обе бригады, вероятно, повысили свои возможности путем взятия зрелых яиц прямо от свиньи женского пола перед выниманием их ядер, вместо того, чтобы собрать яйца у зарезанных животных и назреть их искусственно в лаборатории, которая является тем, что делало большинство потенциальных cloners.
И скорее всего, Дэмиэни добавляет, «будет больше свиней на пути».